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文章编号：（2005）03–0092–06
粉末包衣技术制备盐酸二甲双胍缓释微囊
孙佩男，魏兰兰，郭良然，潘卫三
（沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳，110016）
摘要：目的制备盐酸二甲双胍缓释微囊。方法采用流化床技术，以Eudragit® RS 为缓释包衣材料制备微囊，并运用统计之星软件（SPSS）进行处方和工艺参数的正交设计优化；采用紫外分光光度法进行缓释微囊含量测定和体外释放度测定。结果优化的处方和工艺为：包衣增重为100％，抗黏剂比例为20％，喷雾速率为5 mL·min-1，喷雾压力为150 kPa；释放度试验结果表明，在优化的处方和工艺条件下，可获得在12 h缓释的微囊。结论制得的盐酸二甲双胍缓释微囊具有较为理想的缓释效果，有进一步开发价值。
关键词：药剂学；缓释微囊；粉末包衣技术；盐酸二甲双胍；统计之星软件
中图分类号: R94 文献标识码：A
粉末包衣技术是一种新型的包衣技术，可用于制备缓释制剂，掩盖药物的不良嗅味[1]，提高制剂的稳定性和改善药物的配伍稳定性[2]，制备速释制剂[3]，改善辅料的性质以制备其他制剂等。盐酸二甲双胍（metformin hydrochloride）为双胍类降糖药，临床用于上治疗Ⅱ型糖尿病。口服后主要通过降低肝及外周组织对胰岛素的敏感度来降低血糖水平，对腺体的正常分泌无影响，还可以降低血清脂肪水平，提高纤维蛋白的活性。盐酸二甲双胍的生物半衰期较短，主要吸收部位在小肠，但美国FDA已经在2000年批准其缓释片制剂上市，商品名Glucophage® XR。国内有学者已研制其缓释片和渗透泵片。体内药物动力学和药效学研究表明，其吸收和药效均受食物的影响[4]，特别是片剂等在胃肠道内运动容易受到食物的影响，使盐酸二甲双胍降糖作用存在较大个体差异。微囊制剂粒径一般为50～200 µm之间，受消化道节律运动影响小（如幽门关闭等），更适于制备盐酸二甲双胍缓释制剂。作者以Eudragit® RS 为缓释材料制备了盐酸二甲双胍缓释微丸，并考察了其释放行为。
1 仪器与材料
流化床（FD―MP―01,日本Powrex 工业株式会社），紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器厂），电光分析天平（T6328, 上海天平仪器厂），电子天平（JA1003, 上海天平仪器厂），药物溶出仪（ZRD6―B, 上海黄海制药机械厂），数控超声仪（KQ―00DB, 昆山市超声仪器有限公司）。
盐酸二甲双胍（metformin hydrochloride，陕西安康地区制药厂），Eedagit® RS（德国 Rohm公司），乙基纤维素（英国Colorcon公司），乳糖（沈阳东兴试剂厂），柠檬酸三乙酯（TEC，美国Morflexs公司）。
2 方法与结果
2.1 盐酸二甲双胍缓释微囊的制备
2.1.1 包衣液配制
取Eudargit® RS 100 g 溶于1 000 mL丙酮中,依次加入滑石粉20 g, 柠檬酸三乙酯20 g，二甲基硅油适量，搅拌过夜得到包衣液。
2.1.2 缓释微囊制备
将盐酸二甲双胍原料药粉碎至100目，按处方量与乳糖混合均匀，放入流化床内，调节入口温度至35℃，预热5 min。然后调节沸腾风量（fluidizing air volume）使物料处于最佳流化状态。调节进口温度（inlet temperature）为40 ℃，喷雾压力（spray air pressure）为150 kPa，喷雾速率（spray rate）为5 mL·min-1，采用侧喷方式喷入质量浓度为1 g·L-1的乙基纤维素醇溶液200 mL预造粒，直至喷完，停止喷液继续干燥10 min，取出粒子筛分，取80～120目的粒子再放入流化床内预热5 min，按照“2.3”条优化的处方工艺参数制备微囊，得到的包衣粉末加入质量分数为1%的滑石粉混匀后在40℃老化10 min，得到盐酸二甲双胍缓释微囊，填装胶囊。
2.2 分析方法的确立
2.2.1 紫外吸收波长的选择
参照《中华人民共和国药典》2000版二部，盐酸二甲双胍在波长为233 nm处有最大吸收，本研究中选用紫外分光光度法作为盐酸二甲双胍的体外分析方法，确定测定波长为233 nm。
2.2.2 标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的盐酸二甲双胍原料药50 mg置100 mL量瓶中，加水适量使溶解，加至刻度，摇匀得到标准储备液；分别精密量取储备液0.2、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1 mL至50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在波长233 nm处测定吸收度，结果见表1。
Table 1 UV absorbance value of different concentration of metformin hydrochloride in water
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A 0.178 0.257 0.402 0.562 0.713 0.863
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ρ/(mg·L-1) 2.008 3.012 5.020 7.028 9.036 11.044
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以吸收度（A）对质量浓度（ρ）作线性回归，得回归方程为 ρ=13.175 A –0.342 6 (r =0.999 9，n =6)，可见在2.008～11.044 mg·L-1 内，盐酸二甲双胍水溶液的质量浓度与紫外吸收度线性关系良好。
2.2.3 溶液稳定性试验
精密称取干燥至恒重的盐酸二甲双胍原料药及处方中相应比例的辅料适量，制成质量浓度适宜的水溶液，在37℃下放置48 h，在一定时间取样，经0.8 µm微孔滤膜滤过，测定吸收度（见表2）。
Table 2 UV absorbance value of metformin hydrochloride in water
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t/h 0 6 12 24 36 48 RSD %
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A 0.533 0.537 0.534 0.535 0.529 0.535 0.593
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结果表明，供试品溶液在24 h内稳定。
2.2.4 含量测定
参照《中华人民共和国药典》2000版二部对盐酸二甲双胍片剂含量测定方法，本研究中选用紫外分光光度法作为盐酸二甲双胍缓释微囊的含量测定方法。
取盐酸二甲双胍缓释微囊填装的胶囊10粒，精密称定，取出内容物研细，过60目筛，精密称取细粉适量（约相当于盐酸二甲双胍50 mg），置100 mL量瓶中，加水适量，超声10 min，使盐酸二甲双胍溶解，加水稀释至刻度，摇匀，用0.8 μm微孔滤膜滤过，精密量取续滤液1 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释置刻度，摇匀，在波长233 nm处测定吸收度，采用标准曲线法计算标示百分含量。结果表明，盐酸二甲双胍在缓释微囊中的标示百分含量的质量分数为98.95％。
2.2.5 释放度测定
取用盐酸二甲双胍缓释微囊填装的胶囊，采用转篮装置测定溶出度，以水1 000 mL为溶出介质，转速为50 r·min-1，在规定的时间分别取溶液5 mL，用0.8 μm微孔滤膜过滤，并及时在操作容器中补水5 mL，分别精密量取续滤液1 mL，加水定量稀释50倍，按《中华人民共和国药典》2000版二部附录中紫外分光光度法在波长233 nm处测定吸收度，代入标准曲线方程计算不同时间缓释微囊的累计释放度。
2.3 处方优化
在单因素考察的基础上，进一步采用正交试验对处方和工艺参数进行优化，并应用统计软件SPSS对试验结果进行方差分析。
以包衣增重（A）、抗黏剂滑石粉与Edragit® RS的比例（B）、喷雾速率（C）、喷雾压力（D）等4个主要处方工艺参数进行正交试验设计并考察包衣增重与抗黏剂用量之间交互作用，将各因素依次安排在正交表L8(27)的相应列，各个因素包括2个水平（见表3）。按照制备工艺制备缓释微囊，按“2.2.4”条方法测定缓释微囊在2 、6 、12 h的释放度。参照《中华人民共和国药典》2000版二部附录XIXD缓控释制剂指导原则的规定，采用综合评分法[5]，先对不同处方2、6、12 h三点的释放度评分，再将评分结果进行加权相加后得出综合分。以综合分为指标，采用方差分析方法，对正交试验结果进行分析。将各点的权重均定为1。各点的评分方法为：2 h的释放度P2以30%为标准，计算公式为│P2–30%│，6 h的释放度P6以60%为标准，计算公式为│P6–60%│，12 h的释放度P12以90%为标准，计算公式为│P12–90%│，总分的计算公式为：
yi =│P2–30%│×1＋│P6–60%│×1＋│P12–90%│×1。
具体计算结果见表4。
应用统计软件SPSS对正交试验数据结果的处理，得到正交试验结果表（表5）和单因素统计量（表6）。
表5对4个因素及1个交互作用作出方差分析，各列意义分别为方差来源（Source）、平方和（Type III sumof squares）、自由度（df）、均方（Mean square）、F值、及显著值（Sig.）。由分析结果可知，因素A、B、A×B、C、D 均有显著意义（P<0.05），且影响次序为A＞A×B |